РИФ ИХА ИФА
Электрофорез
Электрофоретическое разделение Аг в полиакрил-
амидном геле
Биообразец (искомый Аг) + специфическая сыворотка, меченная флюорохромом
Биоматериал (сыворотка и др.) помещается в S-зону тест – кассеты для исследуемого образца
В лунках планшета сорбированы Аг (или диагности-ческие Ат)
Добавление Ат, меченных радиоактивным изотопом
S-зон
Перенос пептидов Аг на нитроцеллюлозную мембрану
Ингридиенты:
Моноклональные Ат с коллоидным золотом в S-зоне;
Фиксированные Ат (или рекомбинантные Аг) в зоне Т (тест);
Фиксированные иммунные компоненты в зоне С (контроль)
+ сыворотка больного
Способы отделения Аг+Ат от свободного меченного Аг
1. Гель – фильтрация;
2.Фракционное осаждение иммунного комплекса
Люминисцентная микроскопия
+ радиоактивно меченного конъюгата (или сыворотка против Ig человека, меченная ферментом
+ сыворотка против Ig человека, меченная ферментом (пероксидазой)
Бактерии в мазке светятся по периферии клетки в виде каймы зеленого цвета
Перенос на рентгеновскую пленку
+ субстрат - хромоген
«+» – результат: две розово (красно) – фиолетовые полосы (в зонах Т и С).
Определение радиоактивности иммунного комплекса по количеству импульсов
Регистрация результата на фотометре (определение оптической плотности)
Радиоавтография: «+» – результат – появление полос (пятен) в месте локализации комплекса Аг + Ат
«-» - результат: одна розово – фиолетовая полоса (в зоне С).
Поділіться з Вашими друзьями: |