Міністерство охорони здоров’я україни



Скачати 235.54 Kb.
Сторінка1/10
Дата конвертації09.06.2021
Розмір235.54 Kb.
ТипМетодичні вказівки
  1   2   3   4   5   6   7   8   9   10

МІНІСТЕРСТВО ОХОРОНИ ЗДОРОВ’Я УКРАЇНИ


НАЦІОНАЛЬНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ

імені О.О.БОГОМОЛЬЦЯ


“Затверджено”


на методичній нараді

кафедри мікробіології,

вірусології та імунології

Завідувач кафедри


академік НАН України,

професор Широбоков В.П.

_________________________

“___” _____________200 р.



МЕТОДИЧНІ РЕКОМЕНДАЦІЇ

ДЛЯ ВИКЛАДАЧІВ

Навчальна дисципліна

МІКРОБІОЛОГІЯ, ВІРУСОЛОГІЯ ТА ІМУНОЛОГІЯ”

Модуль № 1

Загальна і спеціальна вірусологія.

Змістовний модуль №10

Загальна вірусологія.

Тема заняття

Культивування вірусів. Індикація вірусної репродукції. (2 заняття).

Курс

2-й

Факультет

Медичний

Методичні вказівки склала:

ас. Мельник Валентина Володимирівна

Київ – 2008





  1. Конкретні цілі:

  • Трактувати морфологію і ультраструктуру вірусів.

  • Аналізувати особливості взаємодії вірусів з живими системами.

  • Оцінювати результати розмноження вірусів в живих системах.

  • Аналізувати методи культивування вірусів в лабораторних умовах.


2. Базовий рівень підготовки.


Назви попередніх дисциплін

Отримані навики

Анатомія людини

Аналізувати інформацію про будову тіла людини, системи, що його складають, органи і тканини

Гістологія, цитологія, ембріологія

Інтерпретувати мікроскопічну та субмікроскопічну структуру клітин

Медична і біологічна фізика

Трактувати загальні фізичні та біофізичні закономірності, що лежать в основі біологічних процесів.

Медична біологія

Пояснювати на молекулярно-біологічному та клітинному рівні закономірності біологічних процесів

Медична хімія

Трактувати загальні фізико-хімічні закономірності, що лежать в основі процесів розвитку клітин




  1. Організація змісту навчального матеріалу.


3.1. Зміст теми:

На практичному занятті студенти знайомляться з методами виявлення вірусів у різних чутливих системах (клітинних культурах, курячих ембріонах, чутливих лабораторних тваринах); вчаться виявляти вірус в культурі клітин за цитопатичною дією; вивчають різні види ЦПД у культурі клітин; знайомляться з методикою постановки реакцій бляшкоутворення під агаровим та бентонітовим покриттям; вивчають вірусні бляшки у культурі клітин під агаровим та бентонітовим покриттям; здійснюють облік “кольорової проби”, що поставлена з метою індикації вірусів у культурі клітин; здійснюють облік реакції гемадсорбції, що поставлена з метою індикації вірусів у культурі клітин;



здійснюють облік реакції гемаглютинації, що поставлена з метою індикації вірусів у хоріоналантоїсній рідині курячого ембріону. Виконані завдання студенти записують у протокол та підписують його у викладача.


    1. . Теоретичні питання до заняття:

  • Методи вивчення вірусів, їх оцінка.

  • Особливості взяття, обробки та транспортування матеріалу для вірусологічних досліджень.

  • Методика підготовки вірусвмісного матеріалу та техніка інфікування чутливих до вірусів систем.

  • Методи культивування вірусів, їх оцінка.

  • Реакції вірусної гемаглютинації і гемадсорбції. Механізм, практичне значення, використання, діагностична цінність.

  • Цитопатична дія вірусів (ЦПД). Класифікація ЦПД вірусів.




    1. . Практичні роботи (завдання), які виконуються на занятті:

  • Ознайомитись з методами виявлення вірусів у різних чутливих системах (клітинних культурах, курячих ембріонах, чутливих лабораторних тваринах).

  • Навчитися виявляти вірус в культурі клітин за цитопатичною дією; вивчити різні види ЦПД у культурі клітин.

  • Ознайомитись з методикою постановки реакцій бляшкоутворення під агаровим та бентонітовим покриттям; вивчити вірусні бляшки у культурі клітин під агаровим та бентонітовим покриттям.

  • Здійснити облік “кольорової проби”, що поставлена з метою індикації вірусів у культурі клітин.

  • Здійснити облік реакції гемадсорбції, що поставлена з метою індикації вірусів у культурі клітин.

  • Здійснити облік реакції гемаглютинації, що поставлена з метою індикації вірусів у хоріоналантоїсній рідині курячого ембріону.




    1. . Перелік основних термінів, параметрів, характеристик, які повинен засвоїти студент на занятті:




Термін

Визначення

1

2

Цитопатична дія віруса (ЦПД)

ЦПД – видимі під мікроскопом морфологічні зміни моношару клітин, що виникають в результаті внутрішньоклітинної репродукції вірусів.

Включення

Включення – скупчення віріонів чи окремих їх компонентів в цитоплазмі чи ядрі клітин, що виявляються під мікроскопом при спеціальному забарвленні. Вірус натуральної віспи утворює цитоплазматичні включення - тільця Гварнієрі.Віруси герпесу та аденовіруси утворюють внутрішньоядерні включення.

Бляшки

Бляшки – обмежені ділянки зруйнованого вірусами моношару клітин під агаровим чи бентонітовим покриттям. Один віріон утворює потомство у вигляді однієї бляшки.

Реакція гемаглютинації

Реакція гемаглютинації (РГА) заснована на здатності деяких вірусів викликати аглютинацію (склеювання) еритроцитів за рахунок вірусних глікопротеїнових шипів – гемагютинінів.

1

2

Реакція гемадсорбції

Реакція гемадсорбції – здатність культур клітин, інфікованих гемагютинуючими вірусами, адсорбувати на своїй поверхні еритроцити.

Кольорова реакція

Кольрова реакція оцінюється за зміною кольору індикатора, що знаходиться в поживному середовищі культивування. Якщо віруси не розмножуються в культурі клітин, то живі клітини в процесі метаболізму виділяють кислі продукти, що призводить до зменшення рН середовища, а відповідно і кольору індикатора. При репродукції вірусу нормальний метаболізм клітин порушується, і вони гинуть, а середовище зберігає свій першопочатковий колір.


3.5 Рекомендації для оформлення протоколу.
Методи індикації вірусів

1. Виявлення цитопатичної дії вірусів (ЦПД) у культурі клітин. ЦПД – це дегенеративні зміни в клітинах, що проявляються в результаті репродукції в них вірусів.



Тип ЦПД

Віруси, що викликають ЦПД


Поділіться з Вашими друзьями:
  1   2   3   4   5   6   7   8   9   10


База даних захищена авторським правом ©res.in.ua 2019
звернутися до адміністрації

    Головна сторінка